MUL assembly cloning Kit（DNA重组构建酶）
1. 产品信息：
| 产品目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| PT008-25 | MUL assembly cloning Kit | 25次 | ￥500 |
| PT008-50 | MUL assembly cloning Kit | 50次 | ￥950 |
| PT008-100 | MUL assembly cloning Kit | 100次 | ￥1,800 |
| PT008-200 | MUL assembly cloning Kit | 200次 | ￥3,400 |
2. 概述：
MUL assembly 克隆技术是一种简单、快速并且高效的DNA无缝克隆技术。MUL assembly克隆试剂盒能通过识别DNA片段和线性化载体末端20个碱基的同源序列来将多个线性DNA片段定向克隆到目的载体上。通过一定的设计，可以将片段无缝克隆到载体的任意位置，而不用受到限制性内切酶位点的限制。该试剂操作简单，反应迅速，成功率高，是实验室克隆工作的一个有力的工具。操作上只需将线性化载体和目的片段按一定比例混合后，通过MUL assembly 的催化，仅需反应15-60min即可进行重组反应，完成定向克隆。
3. 产品组成：
| 组分 | 25rnx | 50rnx | 100rnx | 200rnx |
|---|---|---|---|---|
| MUL assembly mix | 125μl | 250μl | 500μl | 1,000μl |
| Control DNA Mix | 15μl | 15μl | 15μl | 15μl |
性DNA彼此间有20bp的重叠区域，因此在重组构建酶的作用下可以首尾连成环状DNA分子，转化细菌后在Xgal/IPTG培养基
上呈现白色菌斑。而在未加重组构建酶的情况下直接转化细菌，仅会有极少数背景的蓝色菌斑生长。
3. 保存条件：
- 20℃保存,使用过程中避免反复冻融。4. 技术手册：
MUL assembly 设计与操作手册5. 应用案例：
目标：将3个片段（片段1：500bp；片段2：1000bp；片段3：1500bp）一次重组克隆到pUC57载体的EcoRI和HindIII位点之间。
方案设计：
按照技术手册的介绍设计3个片段之间以及片段与载体之间的重叠序列，MUL重构酶会按照设计的顺序将他们连接起来。设计的序列简图如下图所示：
将反应产物转化大肠杆菌，37度培养过夜后，克隆生长情况如下图：
| 载体 + MUL酶 | 载体 + 片断 + MUL酶 |
用载体上的引物PCR扩增插入的片断，检测克隆是否含有预计大小的DNA片断。并将克隆进行培养，提取质粒，单酶切线性化以判断质粒大小。
| PCR扩增插入片断（左边两个为蓝色克隆PCR结果，其余为白色克隆） | 克隆进行培养，抽提质粒后酶切判断质粒大小（左边两个为蓝色克隆结果，其余为白色克隆） |
以上结果显示所挑取的14个白色克隆均含有预定大小的插入片断，所挑取的克隆的阳性率为１００％。
测序结果证实克隆所含有的片断与设计的序列完全一致（数据这里没有展示）。