Sumo 重组蛋白酶

一. 产品信息：

产品目录号	产品名称	规格	价格
LG007	Sumo 重组蛋白酶	100μl/管，1μg/μl（溶于PBS buffer）	询价

长时间可存放于-20℃或-80℃。大包装用前可分装成小管，请勿反复冻融。浓度：2U/µl。

二. 产品介绍：

Sumo 重组蛋白酶（Sumo Protease）为酿酒酵母ulp1蛋白酶的原核表达产物，特异性识别酿酒酵母的类泛素蛋白（ubiquitin-like protein, Sumo），并在Sumo 和融合蛋白之间进行切割。该酶识别Sumo的四级结构，而不是氨基酸序列，因此可以高效而且特异性地将 SUMO 蛋白从重组融合蛋白上切割下来。Sumo蛋白酶在多种温度以及pH7-9条件下，均可以有效剪切，同时可以耐受一定浓度的咪唑，EDTA, 尿素，SDS等抑制成分，因此使用方便，在多种缓冲液中均可完成酶解。其本身带有一个His-tag标签，切割后可以方便地除去。还需要注意的是：酿酒酵母来源的SUMO蛋白表达系统是已知最好的促进原核可溶表达的系统之一，远比Ubiquitin, GST，MBP，TRX等系统更加出色。

三. 来源：

重组大肠杆菌

四. 活性单位定义：

在 1× SUMO Protease Buffer (50 mM Tris-HCl, 1 mM DTT, pH 8.0) 中，30℃反应 1h，剪切>85％的 2 μg 底物所需要的酶量定义为一个活性单位。

五. 酶切条件 :

在酶切缓冲液 (50mM Tris-HCl，150mM NaCl，1mM EDTA，1mM DTT，pH 7.0)中切割100g被检测的融合蛋白，反应条件为5℃，16小时，切割率≥90%，仅需要0.5 g蛋白酶。在16℃条件下，16小时，1µg Sumo蛋白酶可以切割 20mg 融合蛋白，切割效率≥90%。在切割反应过程中，建议先用不同的切割时间摸索最佳条件，用SDS-PAGE电泳来评估切割程度。确定消化融合蛋白需要的Sumo蛋白酶用量。温度和温浴的时间可以根据不同的目标蛋白而进行改变，应该在实验过程中优化切割条件。

六. 储存 :

保存缓冲液：50mM Tris-HCl，150mM NaCl，1mM EDTA，1mM DTT，pH7.4，50% Glycerol。大包装用前可分装成小管，请勿反复冻融，室温放置易产生沉淀。长期保存可以冷冻于-80 ℃。