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DNA/RNA提取服务

一. 技术原理:

核酸具有贮存和传递遗传信息等重要生物功能,是分子生物学研究的主要对象。采用常规吸附柱法抽提样本中的DNA、RNA,为下游实验提供高纯度和高浓度的模板。

DNA提取方法:对基因组DNA的提取方法主要有 CTAB,SDS和其他如玻璃珠法,酶法等。质粒DNA的提取主要有碱裂解法和煮沸法;线粒体,叶绿体DNA的提取主要有差速离心结合SDS法。

RNA提取方法:异硫氰酸胍/苯酚法。基本实验原理:细胞在变性异硫氰酸胍作用下裂解,核酸释放。DNA和RNA在特定pH下溶解度不同而分别于体系的中间相与水相,得以分离。进行有机溶剂抽提,沉淀,得到纯净RNA。


二. 实验流程:

三. 交付标准:

四. 送检流程:

样品类型样品需求保存条件运输条件备注
动物/植物组织保存于RNA保存液中的动/植物组织,单个样品>0.1g。-80℃干冰所有样本均须有唯一标记,且标记清晰可识
临床样本新鲜样本,保存于液氮中的临床样本,单个样品>0.1g(尽量取新鲜组织)。-80℃干冰
种子样本去壳新鲜或保存于液氮中的的种子样本,单个样品>0.2g。-80℃干冰
贴壁/悬浮细胞加入Trizol 后保存在-80℃中不超过一周的细胞样品,每2×106个细胞加入400μlTrizol。-80℃干冰
全血/血清样品用抗凝管保存的外周血5~10ml,骨髓1~3ml;-80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl,每400μl加入400μlTrizol。-80℃干冰
石蜡包埋样品由标准的石蜡包埋盒包埋的石蜡块,有效厚度大于0.1cm;新鲜的FFPE组织切片,每片厚度不超过10μm,2~8张,表面积不超过250mm2-20℃冰袋
引物干粉,≥1OD,如进行预实验,每个基因至少提供两对引物,附带公司引物合成单。-20℃冰袋或常温