DNA/RNA提取服务
一. 技术原理: 核酸具有贮存和传递遗传信息等重要生物功能,是分子生物学研究的主要对象。采用常规吸附柱法抽提样本中的DNA、RNA,为下游实验提供高纯度和高浓度的模板。 DNA提取方法:对基因组DNA的提取方法主要有 CTAB,SDS和其他如玻璃珠法,酶法等。质粒DNA的提取主要有碱裂解法和煮沸法;线粒体,叶绿体DNA的提取主要有差速离心结合SDS法。 RNA提取方法:异硫氰酸胍/苯酚法。基本实验原理:细胞在变性异硫氰酸胍作用下裂解,核酸释放。DNA和RNA在特定pH下溶解度不同而分别于体系的中间相与水相,得以分离。进行有机溶剂抽提,沉淀,得到纯净RNA。 |
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二. 实验流程:
三. 交付标准:
四. 送检流程:
样品类型 | 样品需求 | 保存条件 | 运输条件 | 备注 |
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动物/植物组织 | 保存于RNA保存液中的动/植物组织,单个样品>0.1g。 | -80℃ | 干冰 | 所有样本均须有唯一标记,且标记清晰可识 |
临床样本 | 新鲜样本,保存于液氮中的临床样本,单个样品>0.1g(尽量取新鲜组织)。 | -80℃ | 干冰 | |
种子样本 | 去壳新鲜或保存于液氮中的的种子样本,单个样品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
贴壁/悬浮细胞 | 加入Trizol 后保存在-80℃中不超过一周的细胞样品,每2×106个细胞加入400μlTrizol。 | -80℃ | 干冰 | |
全血/血清样品 | 用抗凝管保存的外周血5~10ml,骨髓1~3ml;-80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl,每400μl加入400μlTrizol。 | -80℃ | 干冰 | |
石蜡包埋样品 | 由标准的石蜡包埋盒包埋的石蜡块,有效厚度大于0.1cm;新鲜的FFPE组织切片,每片厚度不超过10μm,2~8张,表面积不超过250mm2。 | -20℃ | 冰袋 | |
引物 | 干粉,≥1OD,如进行预实验,每个基因至少提供两对引物,附带公司引物合成单。 | -20℃ | 冰袋或常温 |